分光光度计测量原理是什么?

来源：未知
作者：admin
发布时间：2012-10-09 15:56:05

分光光度计测量原理是什么
722型分光光度计的使用方法

分光光度计测量原理是什么：
一、测量原理

分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律：当容液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时，溶液对光的吸收程度A与溶液的浓度c（g/l）或液层厚度b(cm)成正比。其定律表达式A=abc

（a是比例系数）。当c的单位为mol/l时，比例系数用ε表示，则A=εbc称为摩尔吸光系数。其单位为L·mol-1·cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数。

T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=K·C·L(比色皿的厚度)
测定时，入射光I,
吸光系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，即“K”为常数。比色皿厚度一定，“L”、“I0”也一定。只要测出A即可算出“C”。
《分光光度计的表头上，一行是透光率，一行是吸光度。》
二、 722型分光光度计的使用
1、将灵敏度旋钮调至“1”档（信号放大倍率Z小）。
2、开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调至到测试用波长。仪器预热20分钟。
3、打开试样室（光门自动关闭），调节透光率零点旋钮，使数字显示为000.0。（调节T旋钮），盖上试样室盖，将比色皿
架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透光率旋钮使数字显示100.0。如显示不到100.0，则可适当增加微电流放大的倍数。（增加灵敏度
的档数同时应重复（3）调节仪器透光率的“0”位）但尽量使倍率置于低档使用。这样仪器会有更高的稳定性。
4、预热后，按（3）连续几次调整透光率的“0”位和“”的位置，待稳定后仪器可进行测定工作。
三、吸光度“A”的测量
将选择开关置于A 。调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为零，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
四、浓度c的测量
将选择开关由“A”旋至“C”将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路即可读出被测样品的浓度值。
注意事项：
1、测量完毕，速将暗盒盖打开，关闭电源开关，将灵敏度旋钮调至Z低档，取出比色皿，将装有硅胶的干燥剂袋放入暗盒内，关上盖子，将比色皿中的溶液倒入烧杯中，用蒸馏水洗净后放回比色皿盒内。
2、每台仪器所配套的比色皿不可与其它仪器上的表面皿单个调换。

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